دیerlenmeyer شیک فلاسکسسپنشن سیل کلچر کے لیے ایک خاص کلچر کنٹینر ہے، اور مختلف میڈیا کو تیار کرنے، مکس کرنے اور ذخیرہ کرنے کے لیے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے۔یہ کلچر قابل استعمال استعمال کیا جاتا ہے جب Jurkat خلیات کی ثقافت.
جرکات سیل لائن 14 سالہ لڑکے کے پردیی خون سے ماخوذ ہے اور یہ ایک معطلی سیل ہے۔جورکات سے ماخوذ سیل لائنیں جن میں بعض جینز کی کمی ہوتی ہے وہ سیل کلچر بینکوں میں پہلے سے ہی دستیاب ہیں۔لافانی انسانی ٹی لیمفوسائٹ لائنیں بنیادی طور پر شدید ٹی سیل لیوکیمیا، ٹی سیل سگنلنگ، اور وائرل کے داخلے کے لیے حساس مختلف کیموکائن ریسیپٹرز، خاص طور پر ایچ آئی وی اظہار کے مطالعہ کے لیے استعمال ہوتی ہیں۔اس میں حیاتیاتی تحقیق میں ایپلی کیشنز کی ایک بہت وسیع رینج ہے، جیسے کہ رائبونیوکلیز P کے M1-RNA کا مطالعہ کرنے کے لیے Jurkat خلیات کا استعمال، اور M1-RNA کے اینٹی MHC کلاس II ٹرانسکرپشن ایکٹیویٹر (CIITA) کا مطالعہ روکنا۔ سیل کی سطح پر MHC کلاس II کے مالیکیولز کا اظہار۔
erlenmeyer شیک فلاسکس، RPMI1640 میڈیم میں Jurkat سیلز کو کلچر کرتے وقت، 10% FBS کی ضرورت ہوتی ہے۔درجہ حرارت 37°C، 5% کاربن ڈائی آکسائیڈ، PH قدر 7.2-7.4، ایسپٹک مستقل درجہ حرارت کی ثقافت پر کنٹرول کیا جاتا ہے۔سیل الٹرا کلین بینچ میں منتقل کرنے سے پہلے 75% الکحل سے صاف کریں اور جراثیم کش کریں، مائع نائٹروجن ٹینک سے سیل کرائیووئیل نکالیں، اسے فوری طور پر 37°C پانی کے غسل میں رکھیں اور سیل کرائیوٹوب کو جلدی سے ہلائیں تاکہ اسے تیزی سے پگھل سکے۔پھر، سینٹرفیوگریشن، پائپٹنگ اور مکسنگ وغیرہ کے بعد اسے کاشت کے لیے سیل انکیوبیٹر میں رکھا گیا۔
خلیے ماحول کے لیے خاص طور پر حساس ہوتے ہیں۔ایرلن میئر سیل شیک فلاسکس میں جورکات سیلز کو کلچر کرتے وقت، ذاتی حفظان صحت اچھی طرح سے کی جانی چاہیے، جراثیم سے پاک ری ایجنٹس کا استعمال کیا جانا چاہیے، اور بیکٹیریا کو متعارف کرانے اور خلیوں کی نشوونما کو متاثر کرنے سے بچنے کے لیے جراثیم کش آپریشن کے اصولوں پر عمل کیا جانا چاہیے۔
پوسٹ ٹائم: اگست 22-2022